中国一流的离心机生产企业
专注生物医疗、实验室离心机

分析性离心机技术应用于大分子纯度估价及构象

    在前一篇技术文章分析性超速离心机测定分子量中有提到其技术原理及应用范围与同为实验室离心机的制备性超速离心机有所差异。并介绍了分析性超速离心技术应用之一-测定分子量,今天对其技术应用进行补充,分析性离心机技术可以应用于估价大分子纯度和检测大分子中构象的变化。

 

    分析性超速离心机设备的技术原理已广泛地用于研究DNA制剂、病毒和蛋白质的纯度。如果需要准确地估价分子的分子量的话,样品的纯度当然是极其重要的。用沉降速度的技术来分析沉降界面是测定一个制剂均质性的最广泛使用的方法之一。出现单个清晰的沉降界面一般认为是均质的。制剂中的杂质以另外一些峰小现在主峰的二侧或主峰的一侧。

 

    分析性超速离心机已成功地用于检测大分子构象的变化。例如DNA可能以单股或双股出现,其中每一股在本质上可能是线性的,也可能是环状的。如果遇到某种因素(例如有机溶剂或高温)DNA分子可能发生一些构象的变化,这些变化也许是可逆的,也许是不可逆的。构象上的变化可以通过检查

样品在沉降速度中的若异来证实。分子越是紧密,那么它在溶剂中的摩擦阻力越小。分子越是不规则,摩擦阻力就越大,沉降就越慢。因此,通过样品在处理前后沉降速度的差异可以检测它在构象上的变化。

    对于变构蛋白(如天冬氨酸转氨甲酰酶),构象的改变可能伴随着蛋白质与底物或小的配位体(激活剂或抑制剂)的结合。此外,蛋白质用脲素相对氯(高)汞苯甲酸那样的试剂处理可以导致蛋白质解离成它的原体(Protomer)。所有这些变化都可以很容易地用分析性超速离心来进行研究。