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通过定向插入直接区带和上层液体排净进行梯度

离心结束后,必须收集梯度中的样品以便进一步分析,因此需要对使用离心机进行过分离的梯度样品进行分级分离,在分级过程中要保护离心时得到的分离度。一般有直接收集和连续收集,倾倒法直接回收区带、定向插入直接区带收取法和上层液体排净收集法都是直接回收区带的方法。

定向插入直接区带收取法

当能用肉眼直接看到或用物理、化学方法确定出样品区带的位置时,就可以把弯成“L”形的针头直接插入离心管内(如下图),在样品区带的下沿平行移动针头缓缓地将可以观察到的样品区带吸取,该方法简便、快捷,但抽取过量有可能混入其他杂质。使用的条件是要求能准确地判断样品区带所在的位置。

直接区带收取法


上层液体排净收集法

该方法击应用的条件也是需要能用肉眼观察到,或通过物理、化学的方法处理后能判断样品区带的位置。如通过紫外灯观察法、荧光或其他染料结合法等确定出样品区带的位置。可先用口径略粗的吸管把样品区带顶部以上的液体全部吸完。到达样品区带层位置时,再换一支干净的吸管吸取样品区带层。这种方法较费时间,需要有耐心,操作不当也可能会混入杂质。同样可以使用蠕动泵缓缓连续吸出,干扰因素比手工操作少。