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密度梯度离心法的原理及优点和缺点(速率区带离心法)

密度梯度区带离心法(简称速率区带离心法),是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。

密度梯度区带离心法

此法的优点是:

①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;

②适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;

③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。

此法的缺点是:

①离心时间较长;

②需要制备惰性梯度介质溶液;

③操作严格,不易掌握。


密度梯度离心法的原理

不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法。

介质梯度应预先形成,介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。

常用介质:蔗糖、甘油;

密度梯度液的制备用梯度混合器,形成由管口到管底逐步升高的密度梯度;

具体操作流程:离心前将样品小心铺放在密度梯度溶液表面,离心形成区带。离心后不同大小、不同形状、有一定沉降系数差异的颗粒在密度梯度液中形成若干条界面清楚的不连续区带;

应用范围:可用来分离核酸、蛋白质、核糖体亚基及其它成分。

此分离法可用冷冻高速离心机进行,需要相关离心机价格的客户欢迎咨询 英泰离心机。


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