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应用微量细胞离心机单张涂片同时检测性激素受体

应用性激素受体(SHRs)的单克隆抗体免疫组化法对乳腺癌手术标本组织切片进行检测已在国内广泛开展,但乳腺癌细胞学涂片的性激素受体检测报道较少,而常规针吸涂片法由于微粒组织的影响存在厚薄不均、细胞重叠堆积现象,对免疫组化染色影响较大。为此近一年来我们采用微量细胞离心涂片,对在单张涂片上同时检测乳腺性激素受体进行了探索,并获得成功,现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料一次性7号注射针头,英泰离心机1台,皮肤活检环钻器1个。

1.2 方法

1.2.1 制作多孔过滤卡片取过滤卡片一张和活检环钻器(直径0.6cm),按过滤卡片指定位置钻取直径0.6cm圆形孔3个,依次排开(图1)。

1.2.2 取材使用一次性7号注射针头,局部消毒后,无负压穿刺,旋转提插,并变换方向,在肿物内进退6~10次,见针座后孔有组织液溢出迅速拔针,涂片一张,立即95%乙醇固定15min,HE染色,镜下观察细胞形态。如为癌细胞则按上述方法重复穿刺一次,将组织液洗入盛有5ml生理盐水的尿杯中,振荡摇匀,使用自制多孔过滤卡片和英泰离心机,离心涂片后(图2)进行免疫组化性激素检测,抗体选自福州迈新生物技术开发公司即用型第二代免疫组化广谱试剂盒,并与术后石蜡切片免疫组化结果对照。

2 结果

2.1 SHRs阳性细胞表达结果的判断

①微量细胞离心机涂片细胞分布均匀,结构完整,有利于计数和染色,与组织切片内阳性细胞的特征完全相同,即特异型棕黄色颗粒状着色位于细胞核内而不存在于细胞质中(图3)。

②检测结果判断:离心涂片连续计数200个癌细胞,组织切片连续计数500个癌细胞,根据阳性结果判断,即阳性细胞<15%为检测结果阴性,>15%为检测结果阳性。

2.2微量细胞离心涂片与石蜡切片检测结果对照见表1。

表 1 50 例乳腺癌微量细胞离心涂片与石蜡切片对照

表 1 50 例乳腺癌微量细胞离心涂片与石蜡切片对照

3讨论

乳腺癌性激素受体(SHRs)的检测作为一项判断预后及指导临床治疗的有效指标已为临床广泛应用,而应用微量细胞离心机单张涂片同时检测性激素受体未见报道。

通过对50例乳腺癌病例的微量离心涂片与手术标本组织切片检测结果对照,总符合率在92.5%以上,结果是可靠的。但实际操作中一些具体问题影响效果,如固定液的pH值、对抗原的暴露等,造成组织切片假阳性或假阴性,而离心涂片制片过程中避免了抗原的丢失和暴露不好等问题。

应用微量细胞离心机单张涂片同时检测性激素受体

应用微量细胞离心机单张涂片同时检测性激素受体

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