差速离心需要把沉淀重悬和再离心若干次来分离混合物中不同种群的颗粒。如果不同种群颗粒间的沉降系数差值很大，这种方法就比较有效。然而实践中，大多数不同种类的颗粒具有比较相近的沉降速度。用差速离心法得到的沉淀总会被具有相近沉降系数的颗粒所污染。20世纪50年代，Brake建立了速率区带离心法，Meselson和Duve建立了平

当不同大小的细胞具有相同密度或密度之间有重叠时，采用连续等密度离心法或密度屏障法把它们富集到同一区带。当要把它们进一步分离时，则要按照沉降速度不同采用速度沉降法进行分离。 由于分辨率取决于取决于区带宽度和径向路径的比值，沉降系数相差越大细胞区带间距离越大，同一细胞株沉降系数分布越小细胞区带越窄，分辨越

离心过程中，梯度介质在离心力场作用下向离心管下部运动，其密度重新分布，呈下部重上不轻，形成按一定斜率变化的密度梯度。若梯度介质的沉降速度等于相反方向的扩散速度，即形成了平衡梯度。梯度材料在离心过程中形成密度梯度依赖于梯度材料本身，也取决于选择的离心条件。最基本的要求是：形成的梯度范围要包含样品中需要

差速离心可将组织或细胞匀浆分离成沉淀和上清液两部分，根据离心转速和离心时间不同，沉淀和上清液中各部分成分的变化很大。要想得到相对纯的细胞器，通常要进行梯度离心。传统上分了细胞器蔗糖为首选介质，但蔗糖的黏度大，使离心时间延长，高浓度时渗透压高，使细胞密度增大。现在多用碘化密度梯度介质如Iodixanol、Metri

离心管中装有大小不同的颗粒离心时，颗粒移向离心管底部并形成沉淀。如选择的离心力与离心时间刚好使其中所有最大的颗粒全部沉淀，这样将得到没有最大颗粒的上清液。上清液再在较高的速度下离心，以分离中等大小的颗粒，如此继续分离。缺点是得到的沉淀将是不均一的颗粒混合物。如果样品液中所含组分的沉降系数相差10倍以上

离心沉降是利用惯性离心力的作用而实现的沉降。沉降速度是指在强大的离心力作用下，单位时间内物质颗粒沿半径方向运动的距离。颗粒沉降速度与下面三方面因素有关： （１）颗粒本身的性质　沉降速度与颗粒直径和密度成正比。密度相同时大颗粒比小颗粒沉降快；大小相同时，密度大的颗粒比密度小的沉降快。 （２）介质的性质　

１、精密地平衡离心管和它们的内容物是十分重要的。超速离心机转头是镶置在一根很细的轴上，因此在两支离心管平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围。制备性超速离心机两离心管平衡时重量之差不得超过0.1ｇ。有的普通离心机带有离心管套筒，平衡时应带上套筒。一台离心机的套筒只能在该离心机上使用，不能在

差速离心系指低速与高速离心交替进行，用大小不同的离心力使具有不同沉降系数的分子分批分离的方法。它适用于沉降系数的差别在一个到几个数量级的混合样品的分离。Ｓ差别越大，分离效果越好。差速离心常用来分离各种亚细胞器及粗提核酸和蛋白质。例如被分离的物质是一种组织匀浆，可以根据各种亚细胞器的沉降系数大小，选择