离心机沉降系数测定原理

4.样品的纯度和浓度测定
　　分析离心机可以测定样品的纯度和浓度，这亦是分析离心用途。通常样品的离心图形表现一个对称峰形时，可认为该样品是离心均一的。但是在作纯度测定时还要注意样品的测定浓度，应该使样品测定浓度大于测定方法的灵敏度一百倍以上，测定才有意义。譬如Schlieren光路对该样品测定灵敏度为 0.1mg/ml，那么该样品测纯度时的浓度应该是90mg/ml。假如选用样1mg/ml浓度测定，沉降图形即使表现单一峰，仍不能确定其纯度是0%还是99%。如果样品是多组分的，离心图中表现几个峰，根据每个峰的面积与所有峰的总面积的比值可以得到每个组分的相对浓度值。在计算时应该考虑辐射稀释效应，即把各个组分的面积值根据其所在位置用辐射稀释公式校正到液面处的值，然后计算相对。还要注意这样的浓度估测是建立在各个组分具有相同的折射率比值的假设基础上的。根据峰形面积结合该组分的浓度与折射率比值和仪器常数还可以计算该组扫的绝对浓度值。

5.带状沉降法
　　带状沉降法类似于速率区带离心法。方法使用合成界面池，在池中预先加入0.55ml的1M NaCl溶液，然后地2000转／分转速下铺上0.01ml样品液，然后加速到30000转／分，用吸收光路记录样品沉降图形。由于NaNl向样，品带扩散形成一密度梯度区，可以稳定沉降的样品区带。样品中如果有多个沉降系数不同的组分，它们将依各自的沉降速度呈区带沉降。利用这个方法可以检定样品纯度，估测组成的相对含量和沉降系数。适用于微量的核酸和病毒样品的分析测定。

离心机是利用离心力对混合液（含有固形物）进行分离和沉淀的一种专用仪器。实验室常用电动离心机有低速、高速离心机和低速、高速冷冻离心机，以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。其中以低速（包括大容量）离心机和高速冷冻离心机应用最为广泛，是生化实验室用来分离制备生物大分子必不可少的重要工具。在实验过程中，欲使沉淀与母液分开，常使用过滤和离心两种方法。但在下述情况下，使用离心方法效果较好。
　　①　沉淀有粘性或母液粘稠。
　　②　沉淀颗粒小，容易透过滤纸。
　　③　沉淀量过多而疏松。
　　④　沉淀量很少，需要定量测定。或母液量很少，分离时应减少损失。
　　⑤　沉淀和母液必须迅速分开。
　　⑥　一般胶体溶液。

长沙英泰离心机厂  http://www.ytyq.com