梯度离心技术的发展和应用
差速离心需要把沉淀重悬和再离心若干次来分离混合物中不同种群的颗粒。如果不同种群颗粒间的沉降系数差值很大,这种方法就比较有效。然而实践中,大多数不同种类的颗粒具有比较相近的沉降速度。用差速离心法得到的沉淀总会被具有相近沉降系数的颗粒所污染。20世纪50年代,Brake建立了速率区带离心法,Meselson和Duve建立了平平衡梯度离心法,用来分离纯化沉降系数和浮力密度相差很小的颗粒,20世纪60年代和70年代广泛使用甩开吊篮转子和取缔啊转子后,人民更加认识到了密度梯度离心法的巨大潜力。20世纪80年代推广垂直转子密度梯度离心技术,Beckman公司研制的近垂直转子不仅缩短了离心时间,而且能获得很好的分离效果。现在密度梯度离心技术方法应用于细胞、亚细胞器、核酸、蛋白质、酶和受体等生物样品中的分离制备及理化性质、生物学特性研究,成为生命科学、化学、药物研究和生产中不可缺少的技术手段之一。目前分子生物研究飞速发展,,密度梯度离心技术也发挥着更大的作用,同时也促使该项技术不断完善,应用前景十分广阔。 |
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