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通过离心机进行红细胞稀有血型筛选、建库与应用

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通过离心机进行红细胞稀有血型筛选、建库与应用

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  • 来源:
  • 发布时间:2020-09-22
  • 访问量:652

【概要描述】输血时如血型不合会造成患者出现输血的不良反应,因此使用相符的血型是输血安全的前提保证。而作为人类的重要遗传标志-血型,在近年科学的发展下,人们逐步探索分析,已发现300余种现人类红细胞血型抗原。当今,世界多国正努力建立稀有血型细胞血库,当中对所发现的稀有血型,如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等,建立起稀有血型系统,以保证为稀有血型的患者更加快速及时地提供合适红细胞。

 

中国稀有血型筛选与建库

在我们的临床研究中,对于稀有血型的筛选工作和具体项目中,对于引发临床不良输血反应的稀有血型抗原或是表型组合是最值得关注的,而事实证明这些稀有抗原或是表型组合往往存在于如Vel、Lan、Jk(a-b-)、Lu(a-b-)、Rhnull、OH等这些高频率血型抗原组以及多个血型系统中,与此同时我们也对如Fy(a-b+)、Di(a+b-)等能引起输血反应和新生儿溶血病的血型抗原的中国人特有的免疫反应而进行的筛选,并希望建立起符合我国国情的稀有血型库。以此来解决我国临床上的稀有血型不足、不良输血反应的发生等问题来提高我国的输血疗效。


尿素溶血试验

Jk(a-b-)表型的筛选:因稀有血型本身所具有特殊性,充分利用其特点设计出将其筛选出的方法,Kidd血型系统中Jk(a-b-),此种红细胞可在2M的尿素溶液中使其红细胞膜在6h以上的时间内保持完整性。而Jka和Jkb抗原的红细胞在2M尿素溶液中完全溶血的时间不超过30s。其操作过程为:选取RSP加样器设备将标本红细胞稀释到1%的悬液中,并在96孔微量板上加20ul悬液,再将100ul2mol/L尿素溶液加入其中,放置离心机中以800r/min转速离心3min,溶血为阳性,不溶血为阴性,如为阴性者则进一步对血细胞做分子生物学分析。本次通过Jk(a-b-)尿素筛选实验,获得8名Jk(a-b-)表型献血者。

试管法

将选取标本红细胞稀释为2-5%悬液,标记试管(抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H)并加入相应抗血清和标本红细胞各50ul。采用直接离心法或间接抗球蛋白法,轻摇观察结果;发生凝集为阳性,反之为阴性,共发现稀·临床研究·有血型7例。

在我们对稀有血型筛选过程中,有4种稀有血型是采用筛选稀有等位基因的方法。通过采用PCR的定点诱变技术,我们成功构建出含有突变SNP位点的s和Oka血型等位基因的标准质粒,制备出稀有血型等位基因突变点片段,应用在对照分子生物学方法筛选稀有血型。组建多个多重PCR体系,检测等位基因。

 

应用问题

针对稀有血型的应用世界各地各有区别,繁简宽松不一。对于未经检测血液,有的国家如法国,紧急情况下,在得到国家输血机构主任同意后,可以使用被感染(艾滋病感染的除外)的献血者血液。而有的国家直接把决定权交给医生。另一方面,稀有血型的稀少导致在血液的储存、获取都存在了问题,这些问题正待解决。

 

小结

在当前来看,欧美、日本都发达国家都先后完成了各自的稀有血型库的筛选工作,这也预示着稀有血型的筛选工作也得到了世界各国原来越多的关注与重视,而英泰离心机在血细胞分离中起到关键作用。而随着当前IDP和ISBTW/P的逐步完善,使得稀有血型库的发展势头愈发强劲,稀有血型项目带来了安全输血史无前例的态势。对于中国来讲,人种和血型的多样化给我国的稀有血型的筛选工作带来了极大的便利,就当前而言,虽然我国大部分稀有血型尚不明确,但本次筛选也填补了空缺。并为X市血液中心筹建的“中国稀有血型库”提供相关基础数据。在解决临床稀有血型的输血问题时,稀有血型的筛选并建立相应的全国性的网络体系是极其重要的,而扩大筛选范围、增加验证体系都有助于我国稀有血型库的壮大。同时医用离心机技术参数和稳定性的提升都使实验过程得到了保障。

通过离心机进行红细胞稀有血型筛选、建库与应用

【概要描述】输血时如血型不合会造成患者出现输血的不良反应,因此使用相符的血型是输血安全的前提保证。而作为人类的重要遗传标志-血型,在近年科学的发展下,人们逐步探索分析,已发现300余种现人类红细胞血型抗原。当今,世界多国正努力建立稀有血型细胞血库,当中对所发现的稀有血型,如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等,建立起稀有血型系统,以保证为稀有血型的患者更加快速及时地提供合适红细胞。

 

中国稀有血型筛选与建库

在我们的临床研究中,对于稀有血型的筛选工作和具体项目中,对于引发临床不良输血反应的稀有血型抗原或是表型组合是最值得关注的,而事实证明这些稀有抗原或是表型组合往往存在于如Vel、Lan、Jk(a-b-)、Lu(a-b-)、Rhnull、OH等这些高频率血型抗原组以及多个血型系统中,与此同时我们也对如Fy(a-b+)、Di(a+b-)等能引起输血反应和新生儿溶血病的血型抗原的中国人特有的免疫反应而进行的筛选,并希望建立起符合我国国情的稀有血型库。以此来解决我国临床上的稀有血型不足、不良输血反应的发生等问题来提高我国的输血疗效。


尿素溶血试验

Jk(a-b-)表型的筛选:因稀有血型本身所具有特殊性,充分利用其特点设计出将其筛选出的方法,Kidd血型系统中Jk(a-b-),此种红细胞可在2M的尿素溶液中使其红细胞膜在6h以上的时间内保持完整性。而Jka和Jkb抗原的红细胞在2M尿素溶液中完全溶血的时间不超过30s。其操作过程为:选取RSP加样器设备将标本红细胞稀释到1%的悬液中,并在96孔微量板上加20ul悬液,再将100ul2mol/L尿素溶液加入其中,放置离心机中以800r/min转速离心3min,溶血为阳性,不溶血为阴性,如为阴性者则进一步对血细胞做分子生物学分析。本次通过Jk(a-b-)尿素筛选实验,获得8名Jk(a-b-)表型献血者。

试管法

将选取标本红细胞稀释为2-5%悬液,标记试管(抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H)并加入相应抗血清和标本红细胞各50ul。采用直接离心法或间接抗球蛋白法,轻摇观察结果;发生凝集为阳性,反之为阴性,共发现稀·临床研究·有血型7例。

在我们对稀有血型筛选过程中,有4种稀有血型是采用筛选稀有等位基因的方法。通过采用PCR的定点诱变技术,我们成功构建出含有突变SNP位点的s和Oka血型等位基因的标准质粒,制备出稀有血型等位基因突变点片段,应用在对照分子生物学方法筛选稀有血型。组建多个多重PCR体系,检测等位基因。

 

应用问题

针对稀有血型的应用世界各地各有区别,繁简宽松不一。对于未经检测血液,有的国家如法国,紧急情况下,在得到国家输血机构主任同意后,可以使用被感染(艾滋病感染的除外)的献血者血液。而有的国家直接把决定权交给医生。另一方面,稀有血型的稀少导致在血液的储存、获取都存在了问题,这些问题正待解决。

 

小结

在当前来看,欧美、日本都发达国家都先后完成了各自的稀有血型库的筛选工作,这也预示着稀有血型的筛选工作也得到了世界各国原来越多的关注与重视,而英泰离心机在血细胞分离中起到关键作用。而随着当前IDP和ISBTW/P的逐步完善,使得稀有血型库的发展势头愈发强劲,稀有血型项目带来了安全输血史无前例的态势。对于中国来讲,人种和血型的多样化给我国的稀有血型的筛选工作带来了极大的便利,就当前而言,虽然我国大部分稀有血型尚不明确,但本次筛选也填补了空缺。并为X市血液中心筹建的“中国稀有血型库”提供相关基础数据。在解决临床稀有血型的输血问题时,稀有血型的筛选并建立相应的全国性的网络体系是极其重要的,而扩大筛选范围、增加验证体系都有助于我国稀有血型库的壮大。同时医用离心机技术参数和稳定性的提升都使实验过程得到了保障。

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输血时如血型不合会造成患者出现输血的不良反应,因此使用相符的血型是输血安全的前提保证。而作为人类的重要遗传标志-血型,在近年科学的发展下,人们逐步探索分析,已发现300余种现人类红细胞血型抗原。当今,世界多国正努力建立稀有血型细胞血库,当中对所发现的稀有血型,如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等,建立起稀有血型系统,以保证为稀有血型的患者更加快速及时地提供合适红细胞。

 

中国稀有血型筛选与建库

在我们的临床研究中,对于稀有血型的筛选工作和具体项目中,对于引发临床不良输血反应的稀有血型抗原或是表型组合是最值得关注的,而事实证明这些稀有抗原或是表型组合往往存在于如Vel、Lan、Jk(a-b-)、Lu(a-b-)、Rhnull、OH等这些高频率血型抗原组以及多个血型系统中,与此同时我们也对如Fy(a-b+)、Di(a+b-)等能引起输血反应和新生儿溶血病的血型抗原的中国人特有的免疫反应而进行的筛选,并希望建立起符合我国国情的稀有血型库。以此来解决我国临床上的稀有血型不足、不良输血反应的发生等问题来提高我国的输血疗效。
红细胞、白细胞、血清离心机离心后分层

尿素溶血试验

Jk(a-b-)表型的筛选:因稀有血型本身所具有特殊性,充分利用其特点设计出将其筛选出的方法,Kidd血型系统中Jk(a-b-),此种红细胞可在2M的尿素溶液中使其红细胞膜在6h以上的时间内保持完整性。而Jka和Jkb抗原的红细胞在2M尿素溶液中完全溶血的时间不超过30s。其操作过程为:选取RSP加样器设备将标本红细胞稀释到1%的悬液中,并在96孔微量板上加20ul悬液,再将100ul2mol/L尿素溶液加入其中,放置离心机中以800r/min转速离心3min,溶血为阳性,不溶血为阴性,如为阴性者则进一步对血细胞做分子生物学分析。本次通过Jk(a-b-)尿素筛选实验,获得8名Jk(a-b-)表型献血者。

试管法

将选取标本红细胞稀释为2-5%悬液,标记试管(抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H)并加入相应抗血清和标本红细胞各50ul。采用直接离心法或间接抗球蛋白法,轻摇观察结果;发生凝集为阳性,反之为阴性,共发现稀·临床研究·有血型7例。

在我们对稀有血型筛选过程中,有4种稀有血型是采用筛选稀有等位基因的方法。通过采用PCR的定点诱变技术,我们成功构建出含有突变SNP位点的s和Oka血型等位基因的标准质粒,制备出稀有血型等位基因突变点片段,应用在对照分子生物学方法筛选稀有血型。组建多个多重PCR体系,检测等位基因。

 

应用问题

针对稀有血型的应用世界各地各有区别,繁简宽松不一。对于未经检测血液,有的国家如法国,紧急情况下,在得到国家输血机构主任同意后,可以使用被感染(艾滋病感染的除外)的献血者血液。而有的国家直接把决定权交给医生。另一方面,稀有血型的稀少导致在血液的储存、获取都存在了问题,这些问题正待解决。

 

小结

在当前来看,欧美、日本都发达国家都先后完成了各自的稀有血型库的筛选工作,这也预示着稀有血型的筛选工作也得到了世界各国原来越多的关注与重视,而英泰离心机在血细胞分离中起到关键作用。而随着当前IDP和ISBTW/P的逐步完善,使得稀有血型库的发展势头愈发强劲,稀有血型项目带来了安全输血史无前例的态势。对于中国来讲,人种和血型的多样化给我国的稀有血型的筛选工作带来了极大的便利,就当前而言,虽然我国大部分稀有血型尚不明确,但本次筛选也填补了空缺。并为X市血液中心筹建的“中国稀有血型库”提供相关基础数据。在解决临床稀有血型的输血问题时,稀有血型的筛选并建立相应的全国性的网络体系是极其重要的,而扩大筛选范围、增加验证体系都有助于我国稀有血型库的壮大。同时医用离心机技术参数和稳定性的提升都使实验过程得到了保障。

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