浏览数量: 100 作者: 英泰离心机 发布时间: 2020-12-19 来源: 英泰运营部
什么情况下我们才会使用超滤呢?一般是在蛋白质浓缩和更换缓冲液这块,其实超滤就是我们比较熟悉的膜分离技术,它可用来分离溶液中极小的颗粒和溶解的分子。这种方法操作简便,只要有浓缩离心管和离心机就可以完成我们想要的。超滤对被处理的分子比较温和,操作简单,也可以在低温下进行,所以得到许多人的青睐。
操作浓缩离心管前,我们先选择适当的浓缩离心管,加入样本,按照离心管的规范要求进行,最后回收样本。在离心力的作用下,溶液中的小分子溶质和溶剂透过超滤膜,被收集在滤过液瓶中,而大分子溶质被超滤膜截留在浓缩离心管中。所以选择口碑好、高品质的浓缩离心管非常重要。
如何选择浓缩离心管呢?
1.按体积来说,不同的浓缩离心管适合处理不同体积的样本。一般我们都是根据样本来选择的。不过,如果出现样本浓度低,体积大的情况,我们可以选择较小容积的浓缩离心管来反复多次进行离心工作。
2.选择适当的截留分子量:当我们确定样本后,就要选择适当的MWCO。对于蛋白质而言,建议所选滤膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3,截留孔径越小,流速越慢,因此,如果流速是主要的考虑因素,建议选择MWCO为1/3的滤膜;如果重点考虑截留比例,那么最好选择更致密的膜。当然超滤膜对分子的截留是多个因素决定的。在截留分子量之外,还要考虑分子形状、电荷、样本浓度、样本组成及操作条件。
3.浓缩:提到这点,大家相对会熟悉点,超滤可以很方便地浓缩经过稀释的蛋白质样本,以为它比较温和,不会打断DNA,也不会导致蛋白酶活的损失,当然也有回收率较高的优点。
最后需要提醒的是,浓缩离心管是一次性的工具,不建议重复使用。