白鼠魏氏梭菌诊断试验

魏氏梭菌的生物学诊断在生物动物学和动物疾病学研究有非常重要的意义。我们可以通过用离心机分离出来的疑病畜肠内容物接种小动物进行试验。魏氏梭菌根据形成的毒素及对动物的病原性可分为六型(A、B、C、D、E、F)。在兽医工作中，目前常遇见的是B、C、D三型，各型所产生的毒素及所致疾病如下图。

图1

已知魏氏梭菌所产生的主要致死性毒素是α、β、ε和ι(后者是E型菌所产生)，它们在A、B、C、D四型菌中的分布是不同的，因此，用四型菌的抗毒素(血清)同四型菌的毒素作中和试验时，表现为不同情况，如下图所示。

魏氏梭菌B、C、D型引起的疾病，在病畜肠道内容物中含有外毒素。进行动物保护试验，是魏氏梭菌所致疾病的重要诊断方法。

主要用到的器具或设备有：冰箱、恒温箱、离心机、注射器等

一般先以可疑病畜肠内容物接种小白鼠，如引起死亡，就有魏氏梭菌病的可能，然后再作保护试验进一步确诊。如果不引起小白鼠死亡，就无进一步作保护试验的必要。

(1)接种病料的准备：取可疑病畜有严重病变(炎症)的肠管(一般在回肠)的内容物50-100毫升，加数倍生理盐水稀释，充分混合后放冰箱中过夜(也可以不放冰箱过夜)，取上清液以离心机3000转/分离心30分钟，取上清液进行试验。

试验方法：用体内或体外中和试验都可以。若做体内中和试验，取小白鼠两只，—只注射魏氏梭菌抗毒素血清，次日两只均静脉注射病料滤液0.5毫升，若被抗毒素保护的小白鼠不死，而末保护者死亡，则证明为魏氏梭菌所致疾病。

此试验亦可用培养物来做。

(2)各型毒素鉴定  先测定肠内毒素对小白鼠的最小致死量(M.L.D)。以B、C、D三型魏氏梭菌定型血清各0.1毫升，分别与2—5个最小致死量的肠毒素混合，置37℃温箱内中和40—60分钟。分别静脉注射于小白鼠，并没对照组(静注同量肠球素，事先亦在37℃温箱内作用40一60分钟)。试验结果的判定如下图，对照组小白鼠均应死亡。