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根据密度离心方法分离细胞

浏览数量: 100     作者: 英泰离心机     发布时间: 2020-09-12      来源: 英泰运营部

离心技术是仅根据细胞的密度差和沉降速度差进行分离,细胞在液体介质中的沉降速度取决于细胞的大小和密度,也受悬浮介质的密度、黏度、渗透压和力场大小所影响。

根据细胞密度进行分离时,把细胞悬浮液铺放在一连续或不连续密度梯度上,梯度的密度范围应该包括被分离细胞的密度。离心达到平衡后,每一类型的细胞都会在梯度中与之对应的密度位置找到,与细胞大小无关。分离时只要离心机的离心力比速度沉降或离心淘洗所加的离心力大,一般都能获得平衡。

等密度离心可用于制备和分析目的。对于制备分离来说,即使单一类型的细胞株,也有一定密度的不均匀性,细胞混悬液中通常会出现不同类型细胞密度剖面的重叠,即使根据密度分离有一定的局限性,然而在一些情况下,改变细胞等渗环境,引起细胞膨胀或收缩可以改变细胞密度,有些细胞可以忍受高渗透压而不丧失活性。等密度离心与其他技术联合使用时,可以对细胞进行更加有效果的分离。

把细胞加到梯度中有两种方法,一种是把细胞悬浮液加到预形成的连续或不连续密度梯度的顶部;第二种方法是把细胞分散于整个梯度中。在第二种情况下,细胞一开始悬浮于整个密度梯度里,根据细胞在梯度中的位置,一些比周围介质密度小的细胞做向心移动,而比周围介质密度大的细胞作离心运动,而第一种状况下细胞始终沉降。无论哪种加样方法,都会在等密度位置找到细胞。


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