离心机阶梯型蔗糖梯度的形成实验准备要点

上次英泰离心机为大家写过一篇密度梯度的形成和收集基本概述，为大家介绍了密度梯度形成的原理公式，今天我们来说说阶梯型蔗糖梯度形成实验的准备及要点：

1．配制下列浓度的蔗糖溶液各15ml(W/W)。

2．20％、28％、35％、40％、50％配好之后用折光仪核对，如果配得不准需加入浓蔗糖液或加缓冲液调节浓度。多余蔗糖液留作下次实验用。

3．用吸管取上述浓度的蔗糖液各2 ml，由浓到稀加入到12~14ml水平转头的塑料离心管中。铺梯度时离心管应倾斜45°左右，让移液管出口紧接着液面，然后稍松手指让液体缓慢地流入。流速控制以不搅乱界面为宜，每Au一个浓度后，将离心管直立，在液面处用记号笔作一记号，以便离心完成后取样时参考。

4．每层梯度液的量根据离心管的体积和样品量计。12~14ml水平转头的塑料离心管顶部一般留1.5~3ml用于加样品。

5．判别阶梯式梯度的好坏，只要将离心管直立后，对光观察．如果各层有明显的交界面，则铺得比较好；若某一层无交界面或交界面不太清楚，说明界面已搅混，倒去重铺。